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PCR實驗室平面布局要點分析

日期:2023-02-21 點擊: 387 次


PCR技術憑借特異性強、靈敏度高、對檢測樣品要求低、方便快捷等優點,廣泛應用于各種臨床診斷。PCR實驗室是承載PCR技術應用的設施,實驗室的合理設計才能確保檢測結果的可靠性,博泰小編帶大家了解PCR實驗室平面布局相關知識。

 

一、PCR實驗室平面布局要求

 

1、如果采用實時熒光PCR法,則擴增區和分析區可以合并為一個區。

 

2、如果樣本在擴增之前需要粉碎處理,則需要增加一個區域用于樣品的粉碎。

 

3、PCR實驗室一般由試劑儲備區、標本制備區、擴增區、擴增分析區4個區域組成。

 

4、如果采用全自動化PCR分析儀,則標本制備區、擴增區和分析區可以合并為一個區。

 

二、實驗室功能與設備設計要點分析

 

1、試劑儲備區

該區域主要完成試劑和主反應混合液的儲存、配制和封裝工作。所有運送到該區域的試劑和材料不應經過其他區域,試劑和原材料應在本區內儲存和制備。本區域的氣壓應相對外界保持正壓。該區域的設備主要是冰箱、天平、混勻器、低速離心機、加樣器、可移動紫外燈等。

 

2、標本制備區

該區域的功能是樣本的保存、核酸提取和貯存、樣本加入擴增反應管和測定DNA的合成。樣本應直接運送至該區并儲存在本區內,不得經過其他區域。對于氣流壓力的控制,由于在本區內加樣操作可能產生氣溶膠,為避免氣溶膠擴散出去對外界造成污染,本區應對外界保持負壓;同時本區相對于擴增反應混合物配制和擴增區以及擴增產物分析區為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。

 

3、擴增區

該區域的功能是DNA擴增和擴增片段的測定。此外,反應混合液制備成反應混合液和已制備的DNA模板的加入等也可在本區內進行。對于氣流壓力的控制,相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。

 

4、分析區

該區域的功能是擴增產物的分析。該區域可能會用到某些可致基因突變的有毒物質,應特別注意實驗人員的安全防護。對于氣流壓力的控制,該區域是PCR實驗的最后一步,壓力應為最低,相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應盡量減少在本區內的不必要的走動。

 

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